目的 对不同地区白鲜皮柠檬苦素含量分析比较。

方法 采用高效相色谱(HPLC) 法测定柠檬苦素的含量。色谱条件: 色谱柱DiamonsiⅡC18(250 mm×4．6 mm，5 μm) ; 流动相∶乙腈水(42 ∶ 58) ;流速:1．0 ml/min，检测波长:210 nm; 柱温30 ℃; 进样量:5 μl。结果 采用外标法测定，加样回收率98．32%(n= 5)。不同产地含量存在差异。

结论 内蒙古牙克石附近产白鲜皮柠檬苦素含量最高，内蒙古自治区扎兰屯市卧牛河镇白鲜皮柠檬苦素含量最低，含量与其药材原植物的形态呈正相关。在白鲜皮的产区，当地群众还将粉末用作止血药，用于外伤出血及内脏出血等病症。中国植物志中记载白鲜属共有植物5种，分布于欧亚大陆，东至我国的东北，东南至我国江西省北部; 我国有2种，分别是白鲜及新疆白鲜《中国药典》2010年版收载白鲜为药材白鲜皮的正品来源。檬苦素为三萜类成分，有关研究表明，该化合物具有抗氧化及抗真菌等活性。《中国药典》2015年版收载了白鲜皮的梣酮及黄柏酮的含量测定方法; 文献报道了该药材白鲜碱的含量测定方法; 白鲜皮中柠檬苦素含量测定方法未见报道。为此，作者对白鲜皮中柠檬苦素的测定方法进行研究，建立了高效液相色谱的测定方法，为提升白鲜皮质量标准提供科学依据。

一、材料与方法1．实验材料:型高效液相色谱仪( 美国Waters公司) ;UV-1901PC型紫外分光光度计( 上海奥析科学仪器有 限 公 司)。柠 檬 苦 素 标 准 品 ( 批 号:110800-200404) 购自中国药品生物制品检定所; 实验用水为超纯水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

二、白鲜皮样品采集内蒙阿荣旗、扎兰屯、博克图等地，由齐齐哈尔市药品食品检测中心刘春峰鉴定。

样品编号见表1．

三、实验方法: (1) 对照品溶液的制备: 取柠檬苦素对照品适量，精 密 称 定，用 乙 腈 溶 解 并 定 容 至25 ml，得 浓 度 为0．2 mg / ml的柠檬苦素对照品溶液，用0．45 μm微孔滤膜过滤，备用。(2) 样品溶液的制备: 白鲜皮经干燥、粉碎过80目筛。精密称取样品10 g，每个样品取两份，分别对应装入1～ 16号250 ml的圆底烧瓶中，分别加入40 ml石油醚，于70 ℃水浴回流提取2次，每次1 h，合并滤液。过滤，药渣加入40 ml二氯甲烷，于85 ℃水浴回流提取2次，每次1 h，过滤，合并滤液。60 ℃减压回收滤液。浸膏加甲醇溶解，分别定容于8支100 ml容量瓶中，备用。(3) 色谱条件: 采用反相高效液相色谱法，Diamonsi ⅡC18(250 mm×4．6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈-水(42 ∶ 58，v/v) ，流速为1．0 ml/min，柱温为30 ℃，进样量5 μl，检测波长为210 nm。(4) 柠檬苦素标准曲线的绘制: 分别取柠檬苦素对照聘溶液1、2、4、6、8 ml于10 ml容量瓶中，乙腈定容，在相同条件下测定。以峰面积(A) 对浓度(C) 作线性回归，得标准曲线回归方程为A = 3．971 5C－2．329 5，r =0．998 8，浓度在(20 ～ 160)μg / ml范围内线性关系良好。

四、结果与结论1．含量测定方法学研究: (1) 精密度试验: 取同一标准品溶液，连续进样5次，测定峰面积，ＲSD为0．33%，表明本方法精密度较好。(2) 稳定性试验: 取同一样品溶液，分别在0、0．5、1、1． 5、2、2，5、3 h进样5 μl，按照峰面积计算ＲSD为1．01%，结果表明样品溶液至少在3 h内稳定。(3) 重复性试验及柠檬苦素含量测定: 取同一编号的药材粉末5份，按样品溶液的制备方法平行制备，测定峰面积并计算，得柠檬苦素平均含量为3．33 mg/g，ＲSD = 0．84%。(4) 加样回收率试验: 取已知含量的样品溶液5份，分别加入标准品溶液0．10、0．20、0．40 ml( 各两份) ，测定柠檬苦素含量。求得平均回收率为98．32%，ＲSD = 2．6%。2．回归方程: 对照品测定结果处理，得到回归方程:A =3．971 5C－2．329 5，r = 0．998 8。3．样品含量测定: 采用上述制定的HPLC分析方法测定了8个不同产地白鲜皮柠檬苦素的含量。

结果见表3。

五、讨论 (1) 首次建立了白鲜皮中柠檬苦素的含量测定方法，填补测定方法的空白。所建立的方法简便快捷、准确可靠，为白鲜皮质量标准的提升提供依据。(2) 对不同产地白鲜皮中柠檬苦素的含量进行测定，从测定的数据中看到不同产地的白鲜皮柠檬苦素的含量存在差异。内蒙古牙克石市附近产白鲜皮柠檬苦素含量最高，内蒙古自治区扎兰屯市卧牛河镇白鲜皮柠檬苦素含量最低。与其药材原植物的形态呈正相关。